Effect of racial crossing on the seminal parameters of rams submitted to heat stress / Efeito do cruzamento racial nos parâmetros seminais de carneiros submetidos ao estresse de calor

The aim of this study was to evaluate the effect of racial crossing on seminal parameters of eight Santa Inês and crossbred (Santa Inês x Dorper) rams submitted to heat stress, and to monitor the return of these parameters to previously reported. Before to place the insulation bags, two collects of semen through electroejaculation were performed. The insulation pouches were made with double-layer plastic, internally lined with cotton, and fixed around the spermatic funiculus and scrotum with adhesive tape and bandage remaining on the testes of the animals for seven days. The first collect was performed on the day that the pouches were taken (day 0) and thereafter, every seven days, totalizing 15 measurements. Data were submitted to analysis of variance (ANOVA). The analyzed variables were subjected to Dunnett test at 5% probability to compare the values obtained before treatment with those obtained in the following days. In this study it was found that the animals restored normal seminal parameter after the insulation effects, however, the return rate differed slightly among the studied breeds. The crossbred animals restored the seminal patterns, on average, a week before Santa Inês. It is concluded that the racial crossing influences the semen parameters of rams submitted to heat stress.

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do cruzamento racial sobre parâmetros seminais de oito carneiros Santa Inês e mestiços, submetidos ao estresse térmico e monitorar o retorno desses parâmetros aos relatos anteriormente. Antes de colocar as bolsas de insulação, foram realizadas duas coletas de sêmen por meio de eletroejaculação. As bolsas de insulação foram confeccionadas com plástico de camada dupla, revestidas internamente com algodão, fixadas ao redor do funículo espermático e escroto com fita adesiva e bandagem, permanecendo nos testículos dos animais por sete dias. A primeira coleta foi realizada no dia em que as bolsas foram retiradas (dia 0) e a partir daí, a cada sete dias, totalizando 15 coletas. Os dados foram submetidos à análise de variância (ANOVA). As variáveis analisadas foram submetidas ao teste de Dunnett a 5% de probabilidade para comparar os valores obtidos antes do tratamento com aqueles obtidos nos dias seguintes. Neste estudo verificou-se que os animais restauraram os parâmetros seminais normais após os efeitos da insulação, porém, a taxa de retorno diferiu ligeiramente entre as raças estudadas. Os animais mestiços restauraram os padrões seminais, em média, uma semana antes da Santa Inês. Conclui-se que o cruzamento racial influencia os parâmetros seminais de carneiros submetidos ao estresse térmico.

Cryopreservation of boar semen in 0. 5 mL straws at low spermatozoa concentration is better than high concentration to maintain sperm viability / A manutenção da viabilidade do sêmen suíno criopreservado em palhetas de 0, 5 mL em baixas concentrações espermáticas é melhor do que em altas concentrações

To date, no studies have been performed evaluating the effect of boar spermatozoa concentration in 0.5mL freezing straws, leading us to examine this question. Each sperm-rich fraction of the ejaculate (n=25) was diluted at five different sperm concentrations (100, 200, 300, 600 and 800 x 106 spermatozoa/mL), packaged in 0.5mL straws, and subsequently frozen. After thawing, the sperm from all of treatment groups were analyzed to determine motility characteristics using a sperm class analyzer (SCA-CASA), and their plasma and acrosomal membrane integrity, mitochondrial membrane potential, sperm membrane lipid peroxidation and fluidity were analyzed by flow cytometry. An increase in spermatozoa concentration above 300x106 spermatozoa/mL in a 0.5mL straw impaired (p<0.05) the total and progressive motility, curvilinear velocity, straight-line velocity, linearity and beat cross frequency. However, the plasma and acrosomal membrane integrity, mitochondrial membrane potential, membrane lipid peroxidation and fluidity were not influenced (p>0.05) by high spermatozoa concentrations at freezing. Therefore, to increase spermatozoa survival and total and progressive motility after thawing, boar spermatozoa should be frozen at concentrations up to 300x106 spermatozoa/mL.(AU)

Até o momento, não foram realizados estudos que avaliassem o efeito da concentração de espermatozoides/mL em palhetas (0,5mL) para a criopreservação, levando-nos a analisar esta questão. Cada fração-rica do ejaculado (n=25) foi diluída em cinco diferentes concentrações de espermatozoides (100, 200, 300, 600 e 800x106 espermatozoides/mL), envasadas em palhetas de 0,5mL e posteriormente congeladas. Após a descongelação, os espermatozoides de todos os tratamentos foram avaliados a fim de determinar as características de motilidade usando um sistema de análise computadorizada dos espermatozoides (SCA-CASA). A integridade das membranas plasmática e acrosomal, o potencial de membrana mitocondrial, a peroxidação lipídica e a fluidez da membrana foram analisadas por citometria de fluxo. O aumento na concentração de espermatozoides acima de 300x106 espermatozoides/mL diminuiu (p<0,05) a motilidade total e progressiva, velocidade curvilínea, velocidade linear, linearidade e frequência de batimento. No entanto, a integridade da membrana plasmática e acrosomal, potencial de membrana mitocondrial, peroxidação lipídica e fluidez de membrana não foram influenciados (p>0,05) por altas concentrações de espermatozoides durante a criopreservação. Portanto, a fim de melhorar a sobrevivência dos espermatozoides suínos e a motilidade total e progressiva após a descongelação, os espermatozoides suínos devem ser congelados a concentrações não superiores a 300x106 espermatozoides/mL.(AU)

Sensitivity evaluation of the computer-assisted sperm analysis (CASA) in the determination of frozen-thawed bull semen concentration / Avaliação da sensibilidade da técnica computadorizada de análise (CASA) para a determinação da concentração espermática do sêmen bovino congelado

Sperm concentration is traditionally evaluated by counting cells in a hemocytometric Neubauer chamber, often a highly subjective, time-consuming, and laborious technique prevalent in andrology laboratories around the world. However, the Computer-Assisted Semen Analysis (CASA) represents a more consistent method of evaluating sperm concentration that may provide enhancing efficiencies of sperm count. The purpose of this study is to compare the results of these two methods in the analysis of post-thaw concentration of bovine semen. Four hundred and twenty five batches of semen from different bulls were selected, thawed at 37°C for 30 seconds and then homogenized. Aliquots of 40 µL of semen were diluted in 960 µL of distilled water, fixing the rate at 1:25 dilution for analysis in a Neubauer chamber. Conversely, aliquots of 5 µL for each semen dose were submitted to CASA, considered a minimum of five random fields and 2000 sperm count per analysis. The average concentration of sperm cells was 38.96a ± 1.28 in the Neubauer analysis and 35.14b ± 0.82 for the CASA, with the correlation coefficient of 0.87 (P < 0.0001) and reliability of 0.78 (scale ranging from 0 to 1) between the two methods. In conclusion, the results of two techniques for assessing sperm concentration have similar results. However the CASA methodology would yield greater benefit due to precision, consistency, and reduced disposal issues, particularly for large processing laboratories.(AU)

Tradicionalmente, a concentração espermática é avaliada por meio da contagem de células em câmara hemocitométrica de Neubauer, técnica laboriosa adotada na rotina dos laboratórios de andrologia. Uma alternativa para essa contagem é a técnica computadorizada de avaliação espermática (CASA), método que pode aumentar a eficiência e acurácia na determinação da concentração de espermatozoides em uma amostra de sêmen. O presente trabalho relata a avaliação da sensibilidade da técnica CASA para o acesso da concentração de espermatozoides bovinos em pósdescongelação. Foram selecionadas 425 doses de sêmen de reprodutores de diferentes raças, descongeladas a 37°C por 30 segundos e homogeneizadas. Alíquotas de 40 µL de sêmen foram transferidas para tubos cônicos de 1,5 mL previamente preenchidos com 960 µL de água destilada, fixando a taxa de diluição em 1:25 para contagem em câmara de Neubauer. Em contrapartida, alíquotas de 5 µL de cada dose de sêmen foram avaliadas com o emprego do sistema CASA considerando o número mínimo de cinco campos aleatórios e 2 mil espermatozoides por análise. A concentração média de células espermáticas foi de 38,96a ± 1,28 e 35,14b ± 0,82,respectivamente para amostras avaliadas em câmara de Neubauer ou sistema computadorizado, apresentando o coeficiente de correlação de 0,87 (P < 0.0001) e concordância de 0,78 (escala de 0 a 1). Conclui-se que as duas técnicas de avaliação da concentração espermática possuem eficiência similar. No entanto, em virtude da precisão, rapidez e por dispensar a diluição prévia das amostras para a contagem, a CASA é uma alternativa para a contagem de células espermáticas em câmara de Neubauer, sobretudo para grandes centrais de produção de sêmen bovino congelado.(AU)

Relações entre a câmara de Neubauer a espectrofotometria utilizadas para a determinação da concentração espermática de catetos (Pecari tajacu) / Relationship between Neubauer counting chamber and spectrophotometer used for the sperm concentration determination in collared peccaries (Pecari tajacu)

Em ejaculados provenientes de 28 catetos, verificou-se a existência de relações entre a concentração espermática determinada por meio da câmara de Neubauer e a tramitância observada por espectrofotometria, utilizando comprimentos de onda variando de 530 a 590nm. Os ejaculados apresentaram uma concentração média de 283,9±30,8x106 espermatozoides mL-1, com variação de 30 a 640x106 espermatozoides mL-1. Os valores para tramitância variaram entre 36,9 a 96,3, nos diferentes comprimentos de onda. Não foram detectadas relações significativas entre os dois métodos (P>0,05). Dessa forma, não se recomenda a espectrofotometria para os procedimentos de rotina na determinação da concentração espermática em catetos.

In ejaculates derived from 28 collared peccaries, we verified the existence of relationships between sperm concentration determined by the Neubauer counting chamber and the tramitance verified by spectrophotometer, under wavelengths varying from 530 to 590nm. Ejaculates presented a concentration of 283.9±30.8x106sperm m-1, varying from 30 to 640x106sperm mL-1. Values for tramitance varied from 36.9 to 96.3, under different wavelengths. No significant relationship was verified between two methods (P>0.05). Thus, the spectrophotometer is not recommended for routine procedures of sperm concentration measurement in collared peccaries.

Taxa de gestação de vacas nelore inseminadas artificialmente em tempo fixo com diferente concentração espermática e momento de inseminação / Tasa de preñez de vacas nelores inseminadas artificialmente en tiempo fijo con diferente concentración espermática y momento de inseminación / The rate gestation of nellore cows submitted fixed time artificial insemination under different sperm concentration and insemination moment

Neste estudo objetivou-se avaliar a taxa de gestação, 86 vacas foram submetidas à inseminação artificial em tempo fixo (IATF), sob o protocolo: D0 (dia zero) inserção do implante intravaginal de progesterona (CIDR®) e aplicação intramuscular (IM) de benzoato de estradiol (2mg - Estrogin®); D7 retirada do implante e aplicação IM de prostaglandina (Veteglan®), D8 administração IM de Gonadotrofina Coriônica Humana (hCG - Vetecor®) e D9 IATF. Na IATF utilizou-se sêmen comercial de qualidade e eficiência comprovada. As vacas foram divididas em: Grupo 1 (35), Grupo 2 (26) e Grupo 3 (25), e inseminadas utilizando-se uma única dose de sêmen, duas doses juntas e duas doses com intervalo de 12 horas, respectivamente. Após 60 dias realizou-se o diagnóstico de gestação pela palpação transretal, que foi comparado pelo teste do Qui-quadrado. Observou-se que a taxa de gestação foi semelhante entre os grupos [31,43% (11/35), 34,62% (09/26) e 20,00% (05/25) para os grupos 1, 2 e 3, respectivamente), bem como, a sincronia entre a chegada dos espermatozóides ao local da fertilização, indicando que a concentração de espermatozóides e o intervalo de 12 horas entre as IATF não influenciaram a fertilidade de vacas Nelore, quando submetidas às condições desse estudo.

The purpose of this study is to evaluate gestation rate of Nellore cows artificially inseminated in fixed time under different methodologies. Eighty-six Nellore cows, kept grazing, supplemented with protein salt and water ad libitum, were submitted to Fixed Time Artificial Insemination (FTAI) on the following protocol: animals received an intravaginal progesterone device (CIDR®) on day zero (D0) and injection IM intramuscular of estradiol (2mg - Estrogin®). After 7 days (D7), the device was removed and prostaglandin (Veteglan®) IM administered. On the eighth day (D8), 1000UI of human chorionic gonadotrofina (Vetecor®) were IM administered, and, on the ninth Day (D9), the FTAI ? when the animals were randomly assigned into three experimental groups: Group 1 (n=35) were inseminated approximately 48h after the removal of the device with a single dose of commercial semen from a tested and quality-attested bull. The animals from Group 2 (n=26) were inseminated at the same time and conditions of the former group; however, two doses of semen were inserted together, whereas the animals from Group 3 (n=25) were inseminated twice, with an interval of approximately 12h between the insertions. The diagnosis of gestation through transrectal palpation was carried out 60 days later and was compared among the groups by the Qui-squared test. Gestation rate was similar for the animals from the different experimental groups (p<0.05): 31.43% (11/35), 34.62% (09/26) and 20% (05/25) for the animals from Groups 1, 2 and 3, respectively. Thus, it is concluded that under the conditions of this study, the conventional dose of semen traditionally used in AI programs does not interfere with the fertility and sync between the arrival of sperm to fertilize location of cows submitted to FTAI.

En este estudio se buscó evaluar la tasa de preñez, 86 vacas sometidas a la inseminación artificial en tiempo fijo (IATF), bajo el protocolo: D0 (día cero) inserción del implante intravaginal de progesterona (CIDR®) y aplicación intramuscular (IM) de benzoato de estradiol (2mg - Estrogin®); D7 retirada del implante y aplicación IM de prostaglandina (Veteglan®), D8 administración IM de Gonadotrofina Coriónica Humana (hCG - Vetecor®) y D9 IATF. En la IATF se utilizó semen comercial de calidad y eficiencia comprobada. Las vacas fueron divididas en: Grupo 1 (35), Grupo 2 (26) y Grupo 3 (25), e inseminadas utilizándose una única dosis de semen, dos dosis juntas y dos dosis con intervalo de 12 horas, respectivamente. Después de 60 días se realizó el diagnóstico de preñez por palpación transrectal, que fue comparado por el test Qui-cuadrado. Se observó que la tasa de preñez fue semejante entre los grupos 31,43% (11/35), 34,62% (09/26) y 20,00% (05/25) para los grupos 1, 2 y 3 respectivamente, así como, la sincronía entre la llegada de los espermatozoides al local de fertilización, indicando que la concentración de espermatozoides y el intervalo de 12 horas entre las IATF no influenciaron la fertilidad de vacas Nelore, cuando sometidas a las condiciones de ese estudio.

Sperm concentration on the intrauterine artificial insemination in swine / Concentrações espermáticas na inseminação artificial intra-uterina suína

The aim of this work was to evaluate the efficiency of the intrauterine insemination (IUI) in swine, considering the conception rate, farrowing rate, litter size (alive born pigs). For the IUI, the females had been insemination at 24 and 48 hours after the estrus detection, and the inseminating doses of 500 million, 1 billion, 1.5 billion and 2 billion spermatozoa in 20 mL extender had been used. The procedure of catheter insertion through the cervical canal was successfully performed in 97.9 percent of the females. The conception rate was 6.3 percent in the IUI. The farrowing rate in IUI was 87.2 percent but the farrowing rate was 100 percent for the sperm concentration of 500 million. Regarding the number of born pigs and alive born pigs observed in females inseminated with IUI, no significant difference was observed (p > 0.05). The concentration of 500 x 10(6) spermatozoa in 20 mL extender in the intrauterine insemination resulted in an optimal reproductive performance.

Conduziu-se este estudo, com o objetivo de avaliar a eficiência da inseminação intra-uterina (IIU) em suínos, considerando as taxas de retorno ao estro, aborto, parto, além do tamanho da leitegada (número de leitões nascidos e nascidos vivos). Na IIU, as fêmeas foram inseminadas nos tempos de 24 e 48 horas após a detecção do estro, utilizando-se as concentrações de 500 milhões, 1 bilhão, 1,5 bilhão e 2 bilhões de espermatozóides, em 20mL de diluente. A passagem do cateter de IIU através da cérvix foi possível em 97,9 por cento das fêmeas. Foi realizado diagnóstico de retorno ao estro a partir do 18º dia e diagnóstico de gestação por ultrassonografia transcutânea entre o 28º e 30º dias após a inseminação. A taxa de retorno ao estro foi de 6,3 por cento na IIU. A taxa de parto na IIU foi de 87,2 por cento, sendo a taxa de parto para a concentração de 500 milhões de 100 por cento. Com relação ao número de leitões nascidos totais e nascidos vivos, não houve diferenças, entre as diferentes concentrações espermáticas (P>0,05). A utilização da concentração de 500 x 10(6) espermatozóides em 20mL de diluente, com inseminação intra-uterina, obteve-se um bom desempenho reprodutivo.

Dinâmica ovariana, concentração de progesterona e taxa de gestação em vacas Nelore inseminadas artificialmente em tempo fixo sob diferentes metodologias / The follicular dynamics, progesterone concentration and gestation rate of Nellore cows artificially inseminated in fixed time under different methodologies / Dinámica ovárica, concentración de progesterona e índice de preñez en vacas de la raza Nelore inseminadas artificialmente en tiempo fijo bajo diferentes metodologías

Na tentativa de maximizar a eficiência de rebanhos bovinos, a utilização da sincronização de estros e ovulação, associados à IATF, tem sido divulgada e estudada pelas vantagens que oferece. Estudos envolvendo IATF são muitos, atuais, com protocolos e resultados variáveis. No entanto, continua-se pesquisando a precisão do momento da ovulação, a concentração ideal de espermatozóides na dose de sêmen e a redução nas preparações hormonais e custos, viabilizando a utilização rotineira com melhores resultados, e acessibilidade econômica. Pretende-se, com este estudo, avaliar a dinâmica folicular, a concentração de progesterona e a taxa de gestação de vacas Nelore inseminadas artificialmente, em tempo fixo, sob diferentes metodologias. Para tanto, 86 vacas da raça Nelore, de diferentes categorias, mantidas sob pastejo, suplementadas com sal proteinado e água ad libitum, foram submetidas à IATF, seguindo o seguinte protocolo: implante intravaginal de progesterona (CIDR®) no dia zero (D0) e aplicação de estradiol. Após sete dias (D7) o implante foi retirado e aplicou-se PGF2alfa (Veteglan®). No oitavo dia (D8) administrou-se 1000UI de hCG (Vetecor®) e, no nono dia (D9), a IATF, quando as fêmeas foram divididas aleatoriamente, em três grupos experimentais. Dos animais experimentais, escolheram-se aleatoriamente sete animais, para coleta de sangue para dosagem de progesterona sérica, pela técnica de radioimunoensaio de fase sólida, que foi realizada nos dias do implante, na retirada, aos 2, 10, 15, 18 e 23 dias após a retirada do implante. Esses mesmos animais foram submetidos, duas vezes ao dia (manhã e tarde), à ultrassonografia transretal, para avaliação do momento da retirada do implante de progesterona até a IATF, do número de folículos em cada ovário (direito e esquerdo) e do diâmetro do maior folículo presente em cada um deles.

In an attempt to maximize the efficiency of cattle, the use of synchronization of estrus and ovulation associated to FTAI has been published and studied as a result of the advantages it provides. There are a number of current studies related to FTAI - with varied results and protocols. However, the accuracy of the moment of ovulation, the ideal concentration of spermatozoids within the dose of semen, the reduction of hormone preparations, and costs, thus making practical the routine use with better results and economical accessibility, have been researched. The purpose of this study is to evaluate the follicular dynamics, progesterone concentration and gestation rate of Nellore cows artificially inseminated in fixed time under different methodologies. Eight-six Nellore cows, from different categories, kept grazing, supplemented with protein salt and water ad libitum, were submitted to FTAI on the following protocol: animals received an intravaginal progesterone device (CIDR®) on day zero (D0) and injection of estradiol. After 7 days (D7), the device was removed and PGF2alpha (Veteglan®) administered. On the eighth day (D8), 1000UI of hCG (Vetecor®) were administered, and, on the ninth Day (D9), the IATF - when the animals were randomly assigned into three experimental groups. Seven animals were chosen from the experimental animals and had their blood collected for the dosage of serum progesterone by the solid-phase radioimmunoassay technique, which was conducted on the days of the insertion, on the removal, on days 2, 10, 15, 18, and 23 after the insertion removal. The same animals were submitted, twice a day (morning and afternoon), to transrectal ultrasonography for the assessment of the moment of the removal of the device until the FTAI, the amount of follicles in each ovarium (right and left) and the diameter of the longest follicle in each of them.

Con la intención de maximizar la eficiencia de rebaños bovinos, la utilización de sincronización de estros y ovulación, asociados a la IATF, ha sido divulgada y estudiada por las ventajas que ofrece. Estudios involucrando IATF son muchos, con protocolos y resultados variables. Sin embargo, se busca la precisión del momento de la ovulación, la concentración ideal de espermatozoides en dosis de semen y la reducción en preparaciones hormonales y costos, viabilizando la utilización rutinera con mejores resultados y accesibilidad económica. Este estudio pretende evaluar la dinámica folicular, la concentración de progesterona e índice de preñez en ganado lechero de la raza Nelore inseminadas artificialmente, en tiempo fijo, bajo diferentes metodologías. Para tanto, 86 vacas de la raza Nelore, de diferentes categorías, mantenidas bajo pastaje, suplementadas con sal, proteínas y agua ad limitum, fueron sometidas a la IATF, siguiendo el protocolo: implante intravaginal de progesterona (CIDR®) en el día cero (DO) y aplicación de estradiol. Tras siete días (D7) el implante fue retirado y se aplicó PGF2alfa (Veteglan®). En el octavo día (D8) se inyectó 1000UI de hCG (Vetecor®) y, en el noveno día (D9) la IATF, cuando las hembras fueron divididas al alzar, en tres grupos experimentales. De los animales sometidos al experimento, al alzar se eligió siete animales, para recolección de sangre para dosificar progesterona sérica, por la técnica de radioinmunoensayo de fase sólida, que fue realizada en los días del implante. Esos mismos animales fueron sometidos, dos veces al día (mañana y tarde), a la ultrasonografía transrectal, para evaluación del momento de la retirada del implante de progesterona hasta la IATF, del número de folículos en cada ovario (derecho e izquierdo) y del diámetro del mayor folículo presente en cada uno de ellos.